Analiza PCR: kaj je to? Kako jemati analizo PCR

Video: Seme

Ne tako dolgo nazaj je razvil zanesljivo, zelo občutljiv in hiter način za diagnosticiranje različnih nalezljivih bolezni pri ljudeh. Taka metoda se imenuje "analiza PCR". Kaj je to, kar njegovo bistvo, saj lahko opredeli mikroorganizme in kako ga bo, bomo opisali v tem članku.

Zgodovina odkritja

On je izumil način Verižna reakcija s polimerazo (PCR) Ameriški znanstvenik Cary Myullis v letu 1983. Sprva je podjetje patentiran diagnostično metodo "Kit Corporation"V kateri je delal in njen ustvarjalec. Toda leta 1992 je bilo prodanih vse pravice in patenti za "Hoffmann-La Roche". Po tem se je izkazalo, da so bile podobne študije izvajajo vzporedno in so poročali drugi biologi ZDA, kot so Alice Chen, David Edgar, John RRE. Leta 1980 je ukvarjajo s tem vprašanjem in sovjetskih znanstvenikov A. Slyusarenko A. Kaledin in S. Gorodetskega. Zato, da se ugotovi, edini lastnik avtorskih pravic ni bilo mogoče. Veliko izjemne biokemiki so prispevali k razvoju metod reakcije s polimerazo in CERN patentiral svoje novosti. Na tej točki analize PCR poteka skozi posebej opremljenih laboratorijih.

POVZETEK PCR diagnostični

Analiza PCR: kaj je to in kako deluje? Bistvo metode je v tem, da z uporabo posebnega encima DNA polimeraze in vitro za povečanje prostornine posebno mikrobno okolje. Če želite to narediti večkrat pomnožimo voljo DNK materiala. Tako prisotnost patogena v vzorcu se znesek poveča na račun biokemičnega laboratorijske manipulacije in bakterije ne bo težko odkriti v mikroskopom.

Kako je študija materiala?

Za izvedbo analize zahtevano:

• Šablona DNK;
• primerji gradivo povezuje konca fragmenta;
• termostabilno encima DNA polimeraze;
• kemikalije, zagotovitev pravilnega delovanja encimov;
• pufer raztopina, da bi ustvarili ustrezne pogoje za rast in razvoj DNK materiala.

  

Za izvedbo PCR delovati 25-30 ponovitev sestavljen iz treh korakov: denaturacija, žarjenje in raztezanja.

Za analizo polimezarnoy verižno reakcijo z uporabo posebne naprave - ciklerja. Sodobna oprema omogoča namestitev potrebne za ogrevanje in hlajenje cevi program za odpravo napak v času diagnoze.

Kje se prijaviti diagnoze?

Polimezarnoy verižno reakcijo Postopek se uporabljajo v različnih področjih medicine:

• Forenzična ga uporabi za identifikacijo genetskega materiala, kot so las, sline ali krvi;
• PCR analizo krvi prispeva k genotipa, na primer za odkrivanje individualne genetske zasajene odziv na določeno drogo;
• z metodo, ki določi družinskih vezi med ljudmi;
• Najbolj zaželen PCR metoda je postala v medicinski diagnostiki za določanje različnih nalezljivih bolezni.

Kaj okužbe razkriva PCR?

Tako medicina že dolgo uspešno uporablja analizo PCR. Kaj je to, smo se že naučili. In nekateri patogeni je mogoče zaznati z njim? PCR diagnosticiran naslednjim infekcijske bolezni:

• hepatitis A, B, C;
• ureaplasmosis;
• kandidiaza;
• klamidija;
• mikoplazmoze;
• bakterijske vaginosis;
• poljubljanje bolezen;
• Trihomonozo;
• HPV infekcija;
• tuberkuloza;
• herpes okužba 1. in 2. tipa;
• Helicobacter pylori okužbe;
• citomegalovirus;
• difterije;
• salmonelozo;
• okužba s HIV.

  

Prav tako so metode PCR uporabljajo pri diagnozi raka.

Prednosti metode

PCR Diagnostična ima več prednosti:

1. Visoka občutljivost. Tudi z le nekaj molekule DNA mikroorganizma analiza PCR določa prisotnost okužbe. To pomaga metodo za kronično in latentnih bolezni, ki se pojavljajo. Pogosto v takih primerih, je mikroorganizem neobdelana na druge načine.
2. Da bi raziskali kateregakoli ustreznega materiala, kot so slina, kri, spolne selekcije, dlake, epitelijske celice. Najpogostejša je krvni test in urogenitalnega palčka PCR.

   

3. Ne zahtevajo podaljšano rastočih kultur. Avtomatiziran postopek diagnostike omogoča pridobitev rezultate študije po 4-5 urah.
4. Metoda je skoraj povsem verodostojna. Zabeležili le posamezni primeri lažno negativen rezultat.
5. Sposobnost, da prepoznajo več vrst patogenov v enem vzorčnem materialu. To ne le pospeši proces diagnozo bolezni, ampak tudi bistveno zmanjša materialne stroške. Pogosto je zdravnik predpiše celovito analizo PCR. Raziskava je cena, ki jo sestavljajo določitev šest povzročiteljev bolezni pa je okoli 1500 rubljev.

Priporočila o pripravi za analizo

Rezultati veljavna potrebujejo študije PCR, ki se preskuša, v skladu s priporočili iz uvodnih priprav za diagnozo:

1. Pred dostavo sline ne bi smel prehrano in zdravila za 4 ure pred vzorčenjem materiala. Tik pred postopkom, sperite usta z vrele vode.
2. Zgornje pravila je treba voditi in pri jemanju vzorca iz notranjo stran lica. Po izpiranju je priporočljivo opraviti svetlo masažo na koži za javnost prostatsko izločke.
3. Urin se običajno zbirajo doma. Da bi to naredili, boste morali opraviti temeljit stranišče za genitalije. V sterilnem plastičnem vsebniku je potrebno zbrati 50-60 ml urina. Priporočljivo za ženske, da vstavite tampon v nožnico, in moški toliko, kot je mogoče potegniti koža krat zagotoviti čistost materiala. Ne moreš vzeti materiala med menstruacijo.
4. Za dostavo sperme, naj se vzdržijo spolnih odnosov v 3 dneh pred zbiranjem gradiva. Prav tako so zdravniki svetovali, naj opusti uporabo savne in vroče kopeli, alkohol in začinjene hrane. 3 ure je treba pred analizo, da se vzdržijo uriniranje.
5. Prenesti urogenitalni bris, na primer, če je analiza na klamidijo PCR, tako ženske kot moški, je priporočljivo, da se spolno ostalo za 3 dni. 2 tedna pred analizo ne jemljite antibiotikov. Za en teden morate prenehati uporabljati intimne geli, mazila, vaginalne svečke, izpiranje. 3 ure pred študijo, morajo vzdržati uriniranju. Med je menstruacija ograja material ni izvedena, le 3 dni po prenehanju madeži lahko urogenitalni bris.

PCR med nosečnostjo

Čakalna doba za otroka, številne nalezljive bolezni, spolno prenosljive bolezni, so zelo nevarne za razvoj normalno ploda. Spolno prenosljive bolezni lahko sproži intrauterino razvoja, splav ali prezgodnji porod, prirojene okvare otrok. Zato je pomembno, da se v zgodnji nosečnosti sejanja PCR. Opraviti analizo je potrebno pri registraciji - do 12 tednov.

Video: Diagnoza HIV: ELISA, PCR, hitrega testa za HIV

Ograja gradiva prihaja iz kanala materničnega vratu, s posebnim ščetke. Postopek je neboleč in ne predstavlja nevarnosti za dojenčka. Običajno med nosečnostjo analiziranem za metodo Chlamydia PCR, kot tudi ureaplasmosis, mikoplazmozo, citomegalovirusom, herpes, papiloma virusa. Tak preizkus kompleks imenovano PCR 6.

PCR za diagnozo HIV

Glede na to, da je metoda verižne reakcije s polimerazo zelo občutljivi na spremembe v telesu, in pogoji za diagnozo, se lahko veliko dejavnikov vpliva na izid. Zato PCR analizo okužbe s HIV ni zanesljiva metoda, njegova učinkovitost - 96-98%. Preostalih 2-4% testa daje lažno pozitivne rezultate.

Toda v nekaterih primerih brez PCR diagnozo okužbe z virusom HIV ne more storiti. Običajno se izvaja za ljudi z lažno negativen test ELISA. Te številke kažejo, da je oseba, ki še ni razvila protitelesa proti virusu in je ni mogoče odkriti brez povečanja števila večkratnik. Da se to lahko doseže z izvedbo krvni test PCR metodo.

potrebna je tudi diagnoza otrok prvo leto življenja, rojen na HIV-pozitivnih mater. Metoda je edini način, da se zanesljivo določitev statusa otroka.

PCR za diagnozo hepatitisa

Verižna reakcija s polimerazo metoda omogoča detekcijo DNA virusa hepatitisa A, B, C, in pred tvorbo protiteles proti pojavu okužbe ali simptomov. Še posebej učinkovita je analiza PCR na hepatitis C, saj so 85% takšnih bolezni asimptomatski in brez pravočasno zdravljenje postane kronična.

Video: Kje se testirajo ureaplasmosis?

Pravočasno odkrivanje patogena bo pomagalo izogniti zapletom in dolgotrajno zdravljenje.

presejalni Integrirana PCR

Celovite PCR Analiza: kaj je to? Ta metoda polimezarnoy verižna reakcija, ki vključuje določanje hkrati več okužbo vrsta: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovirusa, ureaplasmas urealitikum, herpes simpleks 1 in tip 2, gonoreja, humani papiloma virus. Cena te diagnoze se giblje od 2.000 do 3.500 rubljev. glede na kliniki, materialov in opreme, kot tudi vrsto Analiza: kvalitativna ali kvantitativna. Kaj je potrebno v vašem primeru - zdravnik odloči. V nekaterih primerih, si preprosto zazna prisotnost patogena v drugih, kot so HIV, pomembno vlogo, ki jo kvantitativno titer igral. besedilu "PCR analizo z 12" pri diagnozi vsi zgoraj patogenih pregleda.

Video: PCR - verižna reakcija s polimerazo

Dešifriranja rezultate analize

Analiza Transkripcija PCR je enostavna. Obstaja le 2 indeks lestvica - ". Negativna", "pozitivno" in Ob odkritju patogena lahko zdravniki s 99% zanesljivostjo -ti potrdi prisotnost bolezni in začetkom zdravljenja bolnika. V kvantitativne metode določanja infekcije pri ustreznim številom indeks stolpca odkritih bakterij bo določena. Le zdravnik lahko določi obseg bolezni in predpiše ustrezno zdravljenje.

V nekaterih primerih, na primer pri določanju okužbe z virusom HIV s PCR, z negativnim rezultatom, je treba za dodatne raziskave za potrditev te številke.

Video: Diagnoza klamidija

Kje se testirati?

Kje opraviti PCR analizo v javnem kliniki ali zasebni laboratorij? Na žalost, v občinske zdravstvene ustanove opreme in postopkov, so pogosto zastareli. Zato je bolje, da dajo prednost zasebnih laboratorijih s sodobno opremo in visoko usposobljeno osebje. Poleg tega so v zasebni kliniki dobiš rezultate veliko hitreje.

V Moskvi so številni zasebni laboratoriji ponujajo analizo PCR za različne okužbe. Na primer, v teh klinikah kot "Vita", "Integrirani klinike", "srečna družina", "Uro-Pro", izvedli analizo PCR. cena Raziskava je 200 rubljev. za določanje patogena.

Iz tega lahko sklepamo, da je diagnoza nalezljivih bolezni s PCR v večini primerov hiter in zanesljiv način za odkrivanje tujek v telesu v zgodnjih fazah okužbe. Vendar pa v nekaterih primerih, da izberejo drugih diagnostičnih metod. Določiti potrebo po takšni študiji je lahko le specialist. PCR analiza dešifriranje tudi zahteva profesionalen pristop. Upoštevajte zdravnikov nasvet in ne dajejo svoje teste, ki niso potrebne.